Caracterização dos fenótipos microgliais na sepse e sua modulação fenotípica com minociclina

Abstract

ResumoCom as taxas de mortalidade decorrentes de sepse em declínio, as sequelas causadas pelos seus mecanismos patológicos tornam-se cada vez mais relevantes no contexto clínico dos sobreviventes. A estratégia de modulação fenotípica M1/M2 da microglia neuronal parece promissora em reduzir os danos neuroinflamatórios implicados nesta disfunção orgânica. O estudo analisou o uso do antibiótico minociclina e sua interferência em níveis de marcadores microgliais como possível alternativa na regulação da expressão dos fenótipos pró-inflamatórios ou anti-inflamatórios. Utilizou-se um modelo animal de sepse em ratos machos wistar, induzida através da técnica de ligação e perfuração cecal (CLP), os animais foram divididos em dois subgrupos, os submetidos a CLP e tratados com minociclina e os submetidos a CLP e não tratados com minociclina, por administração em dose única intracerebroventricular de 100μg/kg de minociclina ou de soro fisiológico 0,9%. Os ratos foram mortos imediatamente após o procedimento CLP ou 24 horas, 3, 5, 10 e 30 dias após a cirurgia e seu hipocampo fora removido e analisado bioquimicamente por marcadores de CD11, CD16, CD32, CD206, CCL22, IL1, IL6, IL10, iNOS, TNF-α, TGF, Arginase e Nitrito/Nitrato. Comparamos os grupos através da análise de variância (ANOVA) de duas vias seguido pelo tesde de post-hoc de Tukey. A minociclina atuou, de maneira geral, reduzindo significativamente a expressão dos marcadores e citocinas de microglia M1 – descrita como pró-inflamatória e indutora dano neuronal - no hipocampo dos ratos submetidos a sepse, sem suprimir os marcadores de migroglial M2 – considerada anti-inflamatória, imunoreguladora e imunossupressora – através da análise por RT-qPCR, razão de nitrito e nitrato, método ELISA sanduíche ou ainda por imuno-histoquímica. Esse achado, associado ao conhecimento da neurotoxicidade de fatores pró inflamatórios ao SNC, aventa a possibilidade de eventuais abordagens terapêuticas afim de se reduzir o comprometimento neuronal nos sobreviventes de sepse.