Efeito da associação do uso de vitamina D na gestação e do ômega 3 na prole em um modelo experimental de Transtorno do Espectro Autista

Abstract

O transtorno do espectro autista (TEA) é um distúrbio do neurodesenvolvimento caracterizado por prejuízos na interação social, comunicação verbal e não verbal, além de comportamentos restritos, repetitivos e estereotipados. Estudos sugerem que a deficiência de vitamina D (Vit.) durante a gestação e lactação pode estar associada ao risco aumentado de TEA. Além disso, a suplementação com ômega-3 tem sido relacionada à melhora de aspectos comportamentais e cognitivos nesses indivíduos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos da suplementação com Vit.D durante a gestação e do ômega-3 (ω−3) no período pós-natal em um modelo experimental de TEA induzido por ácido valpróico (VPA). Após a confirmação da gravidez (presença de espermatozoides na vagina), as ratas prenhes receberam gelatina suplementada com Vit.D (500 UI/dia) ou gelatina controle, do dia gestacional (DG) 1 ao 21. No DG 12,5, as fêmeas de cada grupo foram subdivididas e receberam, por via intraperitoneal, uma dose única de VPA (600 mg/kg) ou solução salina (SAL). Após o nascimento, os filhotes foram alocados em subgrupos que receberam tratamento com ω−3, por gavagem, do dia pós-natal (DPN) 14 ao 34. O delineamento experimental resultou em oito grupos: 1) SAL + Gelatina (gest.) + Óleo (pós-gest.); 2) SAL + Gelatina + ω−3 (pós-gest.); 3) SAL + Vit. D (gest.) + Óleo (pós-gest.); 4) SAL + Vit. D (gest.) + ω−3 (pós-gest.); 5) VPA + Gelatina (gest.) + Óleo (pós-gest.); 6) VPA + Gelatina (gest.) + ω−3 (pós-gest.); 7) VPA + Vit. D (gest.) + Óleo (pós-gest.); 8) VPA + Vit. D (gest.) + ω−3 (pós-gest.). As proles foram pesadas no DPN 9 e entre os DPN 14 e 34, e submetidas aos testes comportamentais de busca pelo ninho (DPN 10), geotaxia negativa (DPN 14), campo aberto e teste das três câmaras (ambos no DPN 35). No DPN 21, as proles foram desmamadas e as matrizes eutanasiadas. Após os testes comportamentais, os filhotes também foram eutanasiados. O sangue foi coletado, e os encéfalos foram dissecados em cerebelo e córtex posterior para análise bioquímica dos seguintes parâmetros: estresse oxidativo (oxidação de DCFH-DA, conteúdo de sulfidrilas, atividades das enzimas superóxido dismutase e catalase); níveis de TNF no soro e córtex posterior, e neurotrofinas (BDNF e NGF) no córtex posterior. Os resultados mostraram que a exposição ao VPA durante a gestação não resultou em atrasos no neurodesenvolvimento (maior tempo para encontrar o ninho e realizar a tarefa de geotaxia negativa), déficits sociais e redução do comportamento exploratório. Além disso, o VPA reduziu os níveis séricos de 25(OH)D nas matrizes, induziu dano oxidativo e alterou a atividade de enzimas antioxidantes no córtex posterior e cerebelo. A suplementação com vitamina D, isoladamente ou combinada ao ω−3, foi capaz de atenuar esses efeitos, promovendo aumento nos níveis séricos de 25(OH)D, melhora no neurodesenvolvimento, na sociabilidade, na atividade exploratória, na redução do dano oxidativo e na regulação das enzimas antioxidantes. Conclui-se que a suplementação com vitamina D atenuou de modo significativo os efeitos deletérios do VPA, embora não tenha revertido completamente o fenótipo autista. A associação entre vitamina D na gestação e ω−3 no período pós-natal não potencializa os efeitos na prevenção de danos associados ao TEA em modelo experimental.